การฆ่าเชื้อโรคด้วยมือผ่าตัดควรเป็นไปตามหลักการ "ล้างมือก่อนและฆ่าเชื้อในภายหลัง" ดังนั้นกระบวนการสามารถแบ่งออกเป็นสองขั้นตอนคือล้างมือและฆ่าเชื้อด้วยมือ

สำหรับขั้นตอนแรก "ล้างมือ" ไม่จำเป็นต้องล้างสองครั้ง

สำหรับขั้นตอนที่สอง "ฆ่าเชื้อในมือ" มีสองวิธีในการแนะนำ:
① ล้างวิธีการฆ่าเชื้อด้วยมือนั่นคือหลังจากใช้น้ำยาฆ่าเชื้อโรคมือและเช็ดให้ล้างออกด้วยน้ำประปาและเช็ดให้แห้งเมื่อคุณภาพน้ำประปาไม่เป็นไปตามข้อกำหนดของมาตรฐานสุขาภิบาลน้ำดื่ม GB5749-2006 ศัลยแพทย์ฆ่าเชื้อมือด้วยแอลกอฮอล์ก่อนสวมถุงมือ
② วิธีการฆ่าเชื้อแบบไม่ล้างมือ ให้ใช้น้ำยาฆ่าเชื้อแบบไม่ล้างมือเคลือบแล้วนวดจนน้ำยาฆ่าเชื้อแห้ง

ทำไมผู้คนสับสนว่าการฆ่าเชื้อด้วยมือผ่าตัดเป็นการล้างมือครั้งเดียวหรือสองครั้งเนื่องจากขั้นตอนที่สองของ "วิธีการล้างมือฆ่าเชื้อ" อาจเข้าใจผิดว่าเป็น "ล้างมือ" ครั้งที่สอง ขั้นตอนที่สองอาจเข้าใจผิดว่าเป็น "ล้างมือ" ครั้งที่สองในขั้นตอนที่ "ล้าง" แต่ในความเป็นจริง จุดประสงค์ของขั้นตอนนี้คือการฆ่าเชื้อ ไม่ใช่การทําความสะอาด และไม่ใช่ "ล้างมือ"

ดังนั้นโดยปกติไม่ว่าจะใช้วิธีฆ่าเชื้อด้วยมือแบบใดก็ต้องล้างมือล่วงหน้าเพียงครั้งเดียว แต่ถ้าสุขอนามัยไม่ดีและผิวมีสิ่งสกปรกมากขอแนะนำให้ล้างสองครั้ง